目的 解决样本培养中的污染和培养基干裂问题,促进食品安全检验技术的提高。方法 根据gb 4789.15-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》的要求,对生化培养箱进行改装,调整箱内轴流风机风扇叶,使得内部的循环风向发生改变。结果 生化培养箱内部的循环风向改变后,样本培养中的染菌风险较改变前下降超过50%,且无培养基干裂现象出现。结论 在合适的条件下调整生化培养箱内轴流风机风扇叶,改变循环风向,可以控制样本的染菌风险,防范由培养基干裂所致检测结果误差,从而促进检验结果准确性的提升。
霉菌是对部分丝状真菌的总称,其以蜘蛛网状、绒毛状、地毯状或棉絮状等形态在固体营养基质上存在。霉菌会导致农产品、食品出现发霉变质的情况。因此,必须重视食品检验和卫生质量评价中的霉菌检测工作。由于空气中存在大量的霉菌孢子,所以霉菌检测工作的难点是控制外部环境和培养箱内部环境中的霉菌孢子[1]。gb 4789.15-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》对gb 4789.15-2010标准中霉菌检测相关标准予以改进,将原有倒置平板培养转变为正置平板培养,样本培养中时有污染和培养基干裂发生[2]。鉴于此,本研究以gb 4789.15-2016标准为依据,通过改装生化培养箱,调整箱内轴流风机风扇叶,使得内部的循环风向发生改变,从而解决样本培养中的污染和培养基干裂问题,促进食品安全检验技术的提高。
1 材料与方法
1.1 一般材料
生化培养箱(上海一恒科技有限公司,lrh-250型)、恒温水浴锅(上海福玛实验设备有限公司,hhw-21cu-600b型)、生物安全柜(青岛海尔生物医疗股份有限公司,hr40-ⅱa2型)、四碘四氯荧光素(微生物试剂,北京陆桥技术服务有限公司)、无菌二级水(院内自制)以及霉菌和酵母菌计数质量控制(由中国工业微生物菌种保藏管理中心提供)。
2 方法
2.1 生化培养箱改装原理
准备2台生化培养箱,其中一台不进行任何调整,内部的循环风向为由下至上;另一台调整箱内轴流风机风扇叶,使得内部的循环风向为由上至下。生化培养箱利用轴流风机在箱内形成循环风,使箱内温湿度处于相对稳定状态,但循环风的存在可将外部环境中的霉菌孢子带入生化培养箱中,这是循环风难以避免的缺点。gb 4789.15-2010标准采用倒置培养皿,循环风直吹培养皿皿盖,几乎不存在霉菌污染情况。gb 4789.15-2016标准将培养皿方向调整为正置,改装生化培养箱后循环风向与改装前相反,类似gb 4789.15-2010标准,循环风直吹培养皿皿盖,可有效减少霉菌污染和培养基干裂情况。
2.2 微生物培养实验
微生物实验分别在2台经检验合格、运行良好的生化培养箱(改装前和改装后)中同时进行。
2.2.1 阳性加标样本
无菌水、无菌乳、无菌淀粉、无菌果酱、无菌奶粉各取225 ml,向其中分别置入适量霉菌,制成标号为1、2、3、4、5号的阳性加标样本原液,每个样本进行4次检测,其中2次以gb 4789.15-2016标准检测,剩余2次以petrifilm tm霉菌酵母测试片法(即测试片法)检测,将上述检测方式获得的培养物分别培养于改装前和改装后的培养箱中。
2.2.2 质控样本
由专业人员根据质控样本说明书进行检测,分别培养于改装前和改装后的培养箱中。
2.2.3 阴性样本
每个样本进行2次检测,培养于改装前和改装后的培养箱中。
2.2.4 空白实验
在平板上对四碘四氯荧光素培养基行接种处理,用改装前和改装后的培养箱培养凝固状态下的琼脂。
2.2.5 改装后培养箱重现性、准确性测定
检测阳性加标样本和质控样本在改装后培养箱中的重现性和准确性。
3 结果与分析
3.1 阳性样本的检测结果
3.1.1 阳性加标样本的检测结果
1、2、3、4、5号样本的稀释浓度均为1 000倍和10 000倍,检测结果见表1。